Сюжет иконы «Омовение ног» связан с евангельским рассказом о последней вечере Христа, согласно которому Спаситель во время пасхальной трапезы снял с себя верхнюю одежду, препоясался полотенцем и омыл ноги своим ученикам. Тем самым он дал им новую заповедь — заповедь взаимной любви. Композиция иконы следует этому тексту буквально. Перед сидящими полукругом  апостолами предстоит Христос в коричневом хитоне, он препоясан лентием — полотенцем, которое стало впоследствии символом смирения и духовного очищения человечества. Взгляд сидящего внизу с краю апостола направлен на обнаженные ноги Спасителя — евангельский образ истинного пути. Здесь круговая композиция иконы завершается.  На иконе передан тот евангельский момент, когда Христос отирает полотенцем ногу Петра, который не понимает смысла совершаемого обряда. По преданию он вопрошает: «Тебе ли умывать мои ноги?». Христос устрашает его: «Если не умою тебя, не имеешь части со мною». Иконописец иллюстрирует эти слова, при этом акцентирует жест Петра, который поднимает руку к своей голове, словно напоминая Учителю: «Не только ноги, но и руки и голову». Иоанн беседует с Матфеем. Андрей поднимает ногу и обнажает ступню. Взгляды других апостолов устремлены к Иисусу или выражают сосредоточенную задумчивость, они погружены в себя, размышляют о сказанном. В соответствии с Евангелием омовение ног произошло во время Тайной вечери, и чтение этого текста приходилось на Великий четверг, поэтому икона с таким сюжетом входила в число страстных праздничных образов. Событие это имело глубоко символическое значение, поскольку в нем утверждались важнейшие христианские добродетели: смирение, кротость, любовь к ближнему, служение старшего младшим. 

В художественном решении иконы существенную роль играют необычайные для праздничных сцен пропорции узкой и вытянутой основы. Видимо, это обусловлено расширением состава праздников в праздничном ряду иконостаса. Вытянутые стройные палаты словно нависают над силуэтами почти невесомых фигур. Это придаёт иконе особую легкость и устремленность вверх. Уверенный эскизный рисунок, разнообразие поз и жестов немногочисленных персонажей, живописная и чистая цветовая палитра с тонкими белильными и цветными бликами на драпировках одежд свидетельствуют о довольно раннем времени создания памятников.  Живописность и поэтическая одухотворенность образа, присущие художественному языку этого памятника, позволяют связывать его скорее с 1520-ми — началом 1530-х гг., когда еще сохранялись художественные идеалы начала XVI столетия.